1. Мета: Ця процедура спрямована на забезпечення стандартизованої процедури асептичних операцій і захисту стерильних приміщень.
2. Сфера застосування: лабораторія біологічних досліджень
3. Відповідальна особа: контролер контролю якості
4. Визначення: немає
5. Техніка безпеки
Суворо виконувати асептичні операції для запобігання мікробного зараження; оператори повинні вимкнути ультрафіолетову лампу перед входом у стерильну кімнату.
6. Процедури
6.1. Стерильна кімната повинна бути обладнана стерильною операційною та буферною кімнатою. Чистота стерильної операційної повинна досягати класу 10000. Температура в приміщенні повинна підтримуватися на рівні 20-24°С, а вологість повітря - 45-60%. Чистота чистої лавки повинна досягати 100 класу.
6.2. Стерильну кімнату слід утримувати в чистоті, і категорично забороняється збирати сміття, щоб запобігти зараженню.
6.3. Суворо запобігайте забрудненню всього обладнання для стерилізації та культуральних середовищ. Ті, хто заражені, повинні припинити їх використання.
6.4. Стерильні приміщення повинні бути обладнані дезінфікуючими засобами робочої концентрації, наприклад 5% розчином крезолу, 70% спиртом, 0,1% розчином хлорметіоніну та ін.
6.5. Стерильну кімнату необхідно регулярно стерилізувати та очищати відповідним дезінфікуючим засобом, щоб переконатися, що чистота стерильної кімнати відповідає вимогам.
6.6. Усі інструменти, інструменти, посуд та інші предмети, які необхідно внести в стерильну кімнату, слід щільно загорнути та простерилізувати відповідними методами.
6.7. Перед входом у стерильну кімнату персонал повинен вимити руки з милом або дезінфікуючим засобом, а потім переодягнутися в спеціальний робочий одяг, взуття, головні убори, маски та рукавички в буферній кімнаті (або ще раз витерти руки 70% етанолом) перед входом у стерильну кімнату. Проводити операції в бактеріальній камері.
6.8. Перед використанням стерильного приміщення необхідно включити ультрафіолетову лампу в стерильному приміщенні для опромінення і стерилізації більше ніж на 30 хвилин і одночасно включити чистий стіл для продування повітрям. Після закінчення операції стерильну кімнату необхідно вчасно прибрати, а потім стерилізувати ультрафіолетом протягом 20 хвилин.
6.9. Перед перевіркою зовнішня упаковка досліджуваного зразка повинна бути неушкодженою та не відкриватися, щоб запобігти забрудненню. Перед оглядом продезінфікуйте зовнішню поверхню ватними кульками, розчиненими на 70% спирті.
6.10. Під час кожної операції слід проводити негативний контроль, щоб перевірити надійність асептичної роботи.
6.11. При поглинанні бактеріальної рідини ви повинні використовувати аспіраційну кульку для її поглинання. Не торкайтеся соломинки безпосередньо ротом.
6.12. Інокуляційну голку необхідно стерилізувати полум’ям перед і після кожного використання. Після охолодження культуру можна висівати.
6.13. Соломинки, пробірки, чашки Петрі та інший посуд, що містить бактеріальну рідину, слід замочити у стерилізаційному відрі, що містить 5% розчин лізолу для дезінфекції, а потім дістати та промити через 24 години.
6.14. Якщо на стіл або підлогу пролито бактеріальну рідину, слід негайно вилити 5% розчин карболової кислоти або 3% лізолу на забруднену ділянку принаймні на 30 хвилин перед обробкою. Якщо робочий одяг і головні убори забруднені бактеріальною рідиною, їх слід негайно зняти та випрати після стерилізації парою під високим тиском.
6.15. Усі предмети, що містять живі бактерії, необхідно продезінфікувати перед промиванням під краном. Категорично забороняється забруднювати каналізацію.
6.16. Щомісяця слід перевіряти кількість колоній у стерильному приміщенні. Відкривши чистий стіл, візьміть декілька стерильних чашок Петрі з внутрішнім діаметром 90 мм і в асептичних умовах введіть приблизно 15 мл живильного агаризованого культурального середовища, яке було розплавлене та охолоджене приблизно до 45 °C. Після застигання помістіть його догори дном при температурі від 30 до 35. Інкубуйте протягом 48 годин в інкубаторі ℃. Після перевірки стерильності візьміть від 3 до 5 пластин і розмістіть їх ліворуч, посередині та праворуч від робочого положення. Відкривши кришку та витримуючи їх протягом 30 хвилин, помістіть їх догори дном в інкубатор від 30 до 35°C на 48 годин і вийміть їх. оглядати. Середня кількість різноманітних бактерій на планшеті в чистій зоні класу 100 не повинна перевищувати 1 колонію, а середня кількість бактерій у чистій кімнаті класу 10000 не повинна перевищувати 3 колоній. Якщо межа перевищена, стерильну кімнату необхідно ретельно продезінфікувати, доки повторні перевірки не відповідають вимогам.
7. Зверніться до розділу (Метод перевірки стерильності) у розділах «Методи гігієнічної перевірки лікарських засобів» і «Стандартна практика Китаю щодо перевірки лікарських засобів».
8. Відділ розподілу: відділ управління якістю
Технічна інструкція з чистої кімнати:
Після отримання стерильного середовища та стерильних матеріалів ми повинні підтримувати стерильний стан, щоб досліджувати конкретний відомий мікроорганізм або використовувати його функції. В іншому випадку різні мікроорганізми ззовні можуть легко змішатися. Явище змішування невідповідних мікроорганізмів ззовні в мікробіології називається контамінуючими бактеріями. Запобігання контамінації є критично важливою технікою в мікробіологічній роботі. Повна стерилізація, з одного боку, і запобігання контамінації, з іншого, є двома аспектами асептичної техніки. Крім того, ми повинні запобігти виходу досліджуваних мікроорганізмів, особливо патогенних мікроорганізмів або генно-інженерних мікроорганізмів, які не існують у природі, з наших експериментальних контейнерів у зовнішнє середовище. Для цих цілей в мікробіології існує безліч заходів.
Стерильна кімната, як правило, невелика кімната, спеціально облаштована в мікробіологічній лабораторії. Можна побудувати з листів і скла. Площа повинна бути не дуже великою, близько 4-5 квадратних метрів, а висота повинна бути близько 2,5 метрів. За межами стерильного приміщення слід облаштувати буферну кімнату. Двері буферної кімнати та двері стерильної кімнати не повинні бути спрямовані в одному напрямку, щоб запобігти проникненню різних бактерій повітряним потоком. І стерильне приміщення, і буферне приміщення повинні бути герметичними. Вентиляційне обладнання приміщень повинно мати пристрої для фільтрації повітря. Підлога і стіни стерильної кімнати повинні бути гладкими, не затримувати бруд і легко митися. Робоча поверхня повинна бути рівною. І стерильне приміщення, і буферна кімната обладнані ультрафіолетовими лампами. Ультрафіолетове світло в стерильному приміщенні знаходиться на відстані 1 метра від робочої поверхні. Персонал, який входить в стерильну кімнату, повинен носити стерилізований одяг і головні убори.
В даний час стерильні кімнати в основному існують на мікробіологічних фабриках, тоді як в загальних лабораторіях використовуються чисті стенди. Основною функцією чистої лави є використання пристрою ламінарного повітряного потоку для видалення різного дрібного пилу, включаючи мікроорганізми, з робочої поверхні. Електричний пристрій дозволяє повітрю проходити через гепа-фільтр, а потім надходити на робочу поверхню, так що робоча поверхня завжди знаходиться під контролем потоку стерильного повітря. Крім того, є високошвидкісна повітряна завіса з боку, розташованого ближче до зовнішнього боку, щоб запобігти проникненню зовнішнього бактеріального повітря.
У місцях зі складними умовами замість чистої лавки можна використовувати дерев'яні стерильні бокси. Стерильний бокс має просту конструкцію і його легко переміщати. На передній частині коробки є два отвори, які закриваються дверцятами, коли вони не працюють. Ви можете витягнути руки під час роботи. Верхня частина передньої частини оснащена склом для полегшення внутрішньої роботи. Всередині коробки є ультрафіолетова лампа, а посуд і бактерії можна помістити через маленькі дверцята збоку.
Асептичні методи роботи в даний час не тільки відіграють ключову роль у мікробіологічних дослідженнях і застосуваннях, але також широко використовуються в багатьох біотехнологіях. Наприклад, трансгенна технологія, технологія моноклональних антитіл тощо.
Час публікації: 6 березня 2024 р